服务热线:
13573190684
产品目录
技术文章
首页 > 技术中心 > 液相色谱仪测定葛根素含量

液相色谱仪测定葛根素含量

 发布时间:2017-03-14 点击量:1157

葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata (Willd.) Ohwi的干燥根,是常用中药材,具有解肌退热,生津,透疹,升阳止泻功效,用于外感发热头痛、项背强痛,口渴,消渴,麻疹不透,热痢,泄泻,高血压颈项强痛等[1]。现代研究证实,葛根中的主要有效成分为葛根素等异黄酮类化合物,具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用,同时也有降低血压的作用。有关葛根中葛根素等异黄酮的含量测定研究已有不少报道[2-5],但对葛粉中葛根素含量测定报道不多。本文对葛粉中葛根素的提取条件和测试条件等进行比较研究,并采用液相色谱法对葛粉样品进行了定量分析, 结果令人满意。

 

    1 实验部分

 

    1.1 仪器与试剂

 

    LC-10tvp液相色谱仪;SPD-10T紫外检测器;N2010色谱工作站,岛津UV-265紫外分光光度仪,多功能榨汁机/搅拌机SG300-I。甲醇(色谱纯),水(二次蒸馏),其余均为分析纯。葛根素对照品(中国药品生物制品检定所);鲜葛。

 

    1.2 色谱条件

 

   用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;色谱柱Vertex C18 (150×4.6mm I.D),MeOH-H2O-HAc(30:70:0.5)为流动相,紫外检测波长250nm。

 

    2 结果与讨论

 

    2.1 提取溶剂浓度的选择

 

   精密称取同一样品约0.1g,分别加30%乙醇、50%乙醇和80%乙醇10ml,超声提取60分钟,进样5ul,比较峰面积,实验结果表明30%乙醇提取。

 

    2.2 超声提取时间的选择

 

   精密称取同一样品约0.1g,分别加30%乙醇10ml,超声提取30分钟、45分钟、60分钟,进样5ul,比较峰面积,实验结果表明超声60分钟为zui佳提取条件。

 

    2.3 流动相及流速的选择

 

    试验时曾采用下述流动相进行测定:甲醇-水(25:75)、甲醇-水-醋酸(30:70:0.5)、甲醇-水(30:70)为流动相,结果采用甲醇-水-冰醋酸(30:70:0.5)为流动相,样品分离好。而流速也以1.0ml/min为合适。

 

    2.4 标样溶液的制备

 

   称取一定量葛根素对照品,用30%乙醇溶解配制成浓度为13ug/ml的葛根素标准液。

 

    2.5 葛粉制备

 

   取鲜葛用水洗净切片,称取20g放入搅拌机内,搅拌三次,每次1分钟,每次加水200ml, 150ml,100ml,合并浆汁放置二天,去掉上面的水,下面的粉浆用定量滤纸过滤,低温干燥,放入干燥器中备用。

 

    2.6 供试品溶液制备

 

   称取一定量葛粉于10mL容量瓶中,加30%乙醇10ml,超声提取1h,滤纸过滤,滤液过0.45um滤膜作为供试品溶液。

 

    2.7 线性关系考察

 

    在上述色谱条件下,分别进标样溶液0.5、3、5、7、10μl,测得各峰面积。以葛根素为横座标(A),以峰面积(Y)为纵座标,计算得回归方程:Y=3.90×106x+728.14,相关系数r=0.9999;结果紫外检测葛根素在0.0065-0.13μg范围内呈良好线性关系。

 

    2.8 精密度试验

 

   取上述标样溶液,连续进样5次,测定,RSD为1.11%。

 

    2.9 重复性试验

 

   取同一样品重复测定5次,RSD为1.61%。

 

    2.10 稳定性试验

 

   取上述供试品溶液,0、2、5、7、10h进样,RSD为2.1%,10小时内进样稳定。

 

    2.11 回收率试验

 

    取已知含量的样品,分别加入葛根素标样,按上述方法测定5次,平均回收率为98.6%, RSD为1.76%。见表1。

 

    2.12 样品分析

 

   精密吸取标样溶液5μl与供试品溶液5μl,注入液相色谱仪,测定,结果:葛粉中葛根素的含量为0.06%(n=3),见下图。

 

    3 讨论

 

   本文采用液相色谱法测定葛粉中葛根素的含量,方法简单、快速、准确,结果满意,可用于葛粉中葛根素的含量测定。

 

传真:0531-69980259

邮箱:hanhaij1980@126.com

地址:济南市槐荫区经一路333号保利中心商业楼

版权所有 © 2020 济南精测电子科技有限公司   备案号:鲁ICP备16007636号-3  管理登陆  技术支持:化工仪器网  GoogleSitemap

在线咨询
QQ客服
QQ:454062427
电话咨询
13573190684
关注微信